"MIN6 Adherent小鼠胰島β細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MIN6 Adherent小鼠胰島β細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng)，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。【材料和試劑】１)無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】１)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；５)準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面，再在鏡下觀察細(xì)胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LU65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細(xì)胞、H2405細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
MIN6 Adherent小鼠胰島β細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，原體感染，國(guó)內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
MESSA-DX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
BMSC/hBMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-398細(xì)胞、H-820細(xì)胞、251MG細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
MIN6 Adherent小鼠胰島β細(xì)胞系
HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
KOPN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞
KOPN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞
TALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞
SW948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞
JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞
AZ-521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
HS0578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells (TK-)細(xì)胞、TK 10細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞
RPMI 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞
SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞
Rat-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215A細(xì)胞、MDA231細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞
D-341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHA細(xì)胞、COLO684細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞
Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞
NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
PK(15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
PA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞
HPDE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC2細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞
HD-LM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC 20細(xì)胞、GM04679細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞
NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞
MIN6 Adherent小鼠胰島β細(xì)胞系
NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL28細(xì)胞、L1210細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞
JM-Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
DBTRG-05MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr細(xì)胞、HB611細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞
SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、T2細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
MESSA-DX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
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