"TM4 Adherent小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞在FSH的作用下cAMP產(chǎn)量增加,但對LH無反應(yīng);與原代Sertoli細(xì)胞相比,該細(xì)胞對FSH的反應(yīng)性降低。據(jù)報(bào)道,該細(xì)胞組成性纖溶酶原激活物的產(chǎn)量很低,但可被FSH刺激產(chǎn)生,受維刺激可有大幅增高。該細(xì)胞可產(chǎn)生視黃醇結(jié)合蛋白、組織纖溶酶原激活物和轉(zhuǎn)鐵蛋白;表達(dá)FSH受體、雄激素受體和孕激素受體。鼠痘病毒陰性。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時(shí)間過長或過短:時(shí)間過長,細(xì)胞死亡;時(shí)間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗(yàn)證;4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TM4 Adherent小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對細(xì)胞代數(shù),對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤洗,都會(huì)對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞
CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、mREC細(xì)胞
ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代;每周2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞
CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
TM4 Adherent小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。
tdott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0813細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞、U-2932細(xì)胞
P3-X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 2185細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、H460細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞
TM4 Adherent小鼠睪丸細(xì)胞系
Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
Tu-686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD 293細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞
SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞
Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
RERF-LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1882細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIHA細(xì)胞、H-1437細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
SW-527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
IM 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞
H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞
HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞
PAa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞
SCC 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
G361mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞
SV-HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞
GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞
NIH:OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori:3細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞
S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞
OV433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMO6細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、RSC96細(xì)胞
SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Plaepi 34細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞、BHT101細(xì)胞
CEM-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞
TM4 Adherent小鼠睪丸細(xì)胞系
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞
GM06141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細(xì)胞、THP 1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
Liver-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞
L-540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細(xì)胞、HOP62細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞
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