"P19 Adherent小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:P19細(xì)胞株是從C3H/He小鼠中誘導(dǎo)的惡性畸胎瘤中建立的。該細(xì)胞在含有0.1mM的培養(yǎng)基中可高效率地克隆。該細(xì)胞具有多能性,在500nM維A酸誘導(dǎo)下可以分化成神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞;在0.5%~1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下,分化形成心臟和骨骼肌樣細(xì)胞,但不形成神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞;在DMSO和維A酸同時存在時,細(xì)胞的分化與只有維A酸一樣。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
P19 Adherent小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?!痉盅b稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長,傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149PT細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
P19 Adherent小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時間,消化時間過短時,細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞
NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞
NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞
PANC 203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞
EL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
P19 Adherent小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2-Luc細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞
H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H748細(xì)胞、TE-7細(xì)胞、H2342細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞
CMT93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞
766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
HCET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H295R細(xì)胞、FM88細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
Duck embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
AM-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞、HN-6細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
KMM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞
LN-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLK細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞
CHL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞
T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞
H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞
BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞
MGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 115細(xì)胞、Hs675細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
MESSA-DX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-15細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
KU 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞
P19 Adherent小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞
Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
BMSC/hBMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-398細(xì)胞、H-820細(xì)胞、251MG細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細(xì)胞、A2058細(xì)胞、AdHek細(xì)胞
143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞
Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、hESC細(xì)胞、H-209細(xì)胞
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞
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