"HPAF-II Adherent人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HPAF-II Adherent人胰腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
COLO357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Colon38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
細胞生長特性：貼壁生長
HPAF-II Adherent人胰腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
hMSC-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
mousepodocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞
HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
HPAF-II Adherent人胰腺癌細胞系
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
EST50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞
HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
HCC1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
KYSE180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
HEK 293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞
DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
KYSE0410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞
HMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細胞、SNU-387細胞、KU.812細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
NCIH2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
CaEs17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8-653細胞、SU-DHL-4細胞、B16/BL6細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
HPAF-II Adherent人胰腺癌細胞系
Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
GM17346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細胞、8305C細胞、JHH-2細胞
SF126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH-2細胞、CAL 12細胞、Huh7.5細胞
HMrSV5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細胞、LWnt3A細胞、A10細胞
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