"HPAF-II Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
SNU638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞、AD293細(xì)胞
UCLA NPA871細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB106細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞
SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HPAF-II Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時(shí)搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候，有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
HPAF-II Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項(xiàng)：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時(shí)以上。２.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機(jī)，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞
RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
NCI-HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞、C33細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
NS-20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF CEM細(xì)胞、VK2細(xì)胞、U2932細(xì)胞
Soleus clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞
HPAF-II Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞
H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞
HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞
HemECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
Panc203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCH細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞
MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞
MonoMac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞
NCI-H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
TE-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞、H2291細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
JVM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1 ad細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
HPAF-II Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
mRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞
B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞
LC-2-Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細(xì)胞、HLFa細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
FLC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞
CALU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞、H1770細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞、SW480細(xì)胞
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