"hCMEC/D3 Cells|永生化人腦微血管內皮細胞系
細胞背景資料:腦微血管;內皮細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
Tn5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
SW-948細胞系相關產(chǎn)品:SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
Huh7.5細胞系相關產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產(chǎn)生有害物質,吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
SK.MEL.5細胞系相關產(chǎn)品:Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
CMT 167細胞系相關產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
CMT-167細胞系相關產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
OVCAR433細胞系相關產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
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細胞生長特性:貼壁
NCI-H820細胞系相關產(chǎn)品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
RERFLCMS細胞系相關產(chǎn)品:DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
LTPA細胞系相關產(chǎn)品:NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞
B16-F10-BL6細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
M-1細胞系相關產(chǎn)品:HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞
SUNE 1細胞系相關產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
MIMVEC細胞系相關產(chǎn)品:A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞
G-292細胞系相關產(chǎn)品:U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞
HTori-3.1細胞系相關產(chǎn)品:BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
FLC7細胞系相關產(chǎn)品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
NCI-128細胞系相關產(chǎn)品:SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞
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CHAGOK1細胞系相關產(chǎn)品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
Pfeiffer細胞系相關產(chǎn)品:L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
SuDHL 4細胞系相關產(chǎn)品:Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
253J-BV細胞系相關產(chǎn)品:VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
HCCC-9810細胞系相關產(chǎn)品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
Detroit 562細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
KU-812F細胞系相關產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
KU-812F細胞系相關產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
130T細胞系相關產(chǎn)品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
HOS-MNNG細胞系相關產(chǎn)品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
SupT1細胞系相關產(chǎn)品:HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
VK2細胞系相關產(chǎn)品:COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
VMM5細胞系相關產(chǎn)品:NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
HCC-1954BL細胞系相關產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
A-498細胞系相關產(chǎn)品:Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞
OEC19細胞系相關產(chǎn)品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
CEM-CCRF細胞系相關產(chǎn)品:PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
7404細胞系相關產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
Hs 746T細胞系相關產(chǎn)品:APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞
OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
Caco2-BBE細胞系相關產(chǎn)品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
OVHM細胞系相關產(chǎn)品:MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
L 428細胞系相關產(chǎn)品:SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
BMDC細胞系相關產(chǎn)品:KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
MLTC-1細胞系相關產(chǎn)品:MV3細胞、HemECs細胞、SK N SH細胞
HEK-293FT細胞系相關產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
BE(2)M17細胞系相關產(chǎn)品:Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
CAL39細胞系相關產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞
ROS 17/2.8細胞系相關產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
H1954細胞系相關產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
GA10細胞系相關產(chǎn)品:H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
TE12細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞
MGSMC細胞系相關產(chǎn)品:WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
H-2291細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
Panc-8_13細胞系相關產(chǎn)品:HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
SW 948細胞系相關產(chǎn)品:MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞
MGC-803細胞系相關產(chǎn)品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
HCC 70細胞系相關產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
GM03671細胞系相關產(chǎn)品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關產(chǎn)品:RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
SVG p12細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
PC2細胞系相關產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
HS688AT細胞系相關產(chǎn)品:OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
PCI-4B細胞系相關產(chǎn)品:GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
TCMK-1細胞系相關產(chǎn)品:L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
NCI-H2023細胞系相關產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
TE1細胞系相關產(chǎn)品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品:GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
hCMEC/D3 Cells|永生化人腦微血管內皮細胞系
HOMEC細胞系相關產(chǎn)品:SK-MES細胞、MLTC-1細胞、CL 1-0細胞
NBL-S細胞系相關產(chǎn)品:CZ-1細胞、Ly1細胞、BRL 3A細胞
MIMVEC細胞系相關產(chǎn)品:A2780細胞、OCI/AML4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
FCCH1024細胞系相關產(chǎn)品:TSUpr1細胞、253J-BV細胞、B-104細胞
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