"Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：慢性粒細(xì)胞白血??；男性
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
UACC 893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞、293S細(xì)胞
H-1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞
細(xì)胞生長：懸浮
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、TO175T細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
SNU216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞、HeLa細(xì)胞
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞系
HaCaT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
PC-9S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞
SW 1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞
NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
GM05372細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細(xì)胞、HF-91細(xì)胞、FaDu細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
HCC0202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞
PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞
BEL-7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞
OC 316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539 BT細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
Eph4 1424細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDMEC細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞
293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞
RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞
EBNA-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞、GP5d細(xì)胞
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞
P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
L- cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞
MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞
SK-N-BE-2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
Tu212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細(xì)胞、RT4P細(xì)胞、H-1436細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞系
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、TEC細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞
786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、H810細(xì)胞
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、MV4II細(xì)胞
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