"RBL-2H3 Lymphoblastoid cells大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞 NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞 GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞 細胞生長:懸浮 RBL-2H3 Lymphoblastoid cells大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞 NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞 MOLM16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞 SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞 GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 RBL-2H3 Lymphoblastoid cells大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞 AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞 NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞 KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞 ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞 ANA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-127細胞、KBM7細胞、H-2081細胞 HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞 NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞 SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞 MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞 RBL-2H3 Lymphoblastoid cells大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞系 NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞 WSUDLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞 Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞 HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞 OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞 LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞 HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞 SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞 P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞 KOPN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞 A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞 SUIT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞 WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞 SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞 NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞 NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞 A375mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞 HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 NCI-H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞 PANC-03-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞 SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞 C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞 NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞 MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞 3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞 BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞 OVCAR-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞 Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞 AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞 Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞 Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞 HCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞 HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞 NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞 Granta 519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET-1A細胞、J 774A.1細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞 DITNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞 KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞 L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞 MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞 3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞 RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞 H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞 NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞 NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞 SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞 HCa/16A3-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞 CaSki細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞 GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞 RBL-2H3 Lymphoblastoid cells大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞系 MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞 AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細胞、B-3細胞、OC-3-VGH細胞 HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-8_13細胞、Hs 445細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞 NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 637細胞、GM 637細胞、HHL-5細胞 "
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