"RS1 fibroblast cells大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系來源于一大鼠的皮膚組織。2007年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。 細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞 PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞 UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 RS1 fibroblast cells大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞 CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988s細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞 HCC1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-829細(xì)胞、3T6細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞 Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞 H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 RS1 fibroblast cells大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 DHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞 MC3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞 Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞 Hs852T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞 SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC-1細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞 A-253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞、SW756細(xì)胞 H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞 TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞 UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞 NCI-H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA.1細(xì)胞、H1693細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞 RS1 fibroblast cells大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞系 Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞 PLC PRF 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RLE-6TN細(xì)胞、U-2932細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞 SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞 RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞 BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞 Capan1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-20細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞、HRMC細(xì)胞 RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞 KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞 DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞 CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞 A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞 OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞 SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞 B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞 RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞 CHP-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞 SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞 NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞 WSU-HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細(xì)胞、H2073細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞 MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞 C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞 EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞 HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞 Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞 KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞 RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞 RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞 BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、751-NA細(xì)胞 LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞 138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYKnu細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞、DrG細(xì)胞 AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞 SF126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH-2細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞 MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞 Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞 OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞 EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞 HT22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞 GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞 Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞 U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞 OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞 Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞 H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞 BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞 SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞 A-375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞、NR8383細(xì)胞 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