"EFM-192A epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞背景資料:乳腺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 SUDHL5細胞系相關產(chǎn)品:T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞 HT 1376細胞系相關產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞 SW 1116細胞系相關產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞 細胞生長:貼壁 EFM-192A epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 VeroE6細胞系相關產(chǎn)品:HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞 AtT 20細胞系相關產(chǎn)品:HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞 HGSMC細胞系相關產(chǎn)品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞 BrCL15細胞系相關產(chǎn)品:Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞 PL 45細胞系相關產(chǎn)品:RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 EFM-192A epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! NCI-SNU-423細胞系相關產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞 NCI-128細胞系相關產(chǎn)品:SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞 RBMVEC細胞系相關產(chǎn)品:DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞 MESSA細胞系相關產(chǎn)品:M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞 IM-95細胞系相關產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞 SW 1783細胞系相關產(chǎn)品:BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞 Eca109細胞系相關產(chǎn)品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞 TPC-1細胞系相關產(chǎn)品:OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞 P3.times.63 Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞 SK RC 52細胞系相關產(chǎn)品:RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞 EFM-192A epithelioid cells人乳腺癌細胞系 SUDHL5細胞系相關產(chǎn)品:T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞 TE-1細胞系相關產(chǎn)品:OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞 NCI-H1755細胞系相關產(chǎn)品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞 NB1-RGB細胞系相關產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞 EAhy926細胞系相關產(chǎn)品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞 WEHI 3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞 Mouse podocyte細胞系相關產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 SNU16細胞系相關產(chǎn)品:CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞 L 1210細胞系相關產(chǎn)品:BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞 NCIH378細胞系相關產(chǎn)品:COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞 IFRS1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞 H-378細胞系相關產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞 Eca109細胞系相關產(chǎn)品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞 Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞 LNCaP clone FGC細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞 SCL-2細胞系相關產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞 Sf-21細胞系相關產(chǎn)品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞 AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞 TSUpr1細胞系相關產(chǎn)品:SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞 ReNcell CX細胞系相關產(chǎn)品:HM06.A1細胞、U251MG細胞、P3-x63-Ag8 653細胞 OV3121細胞系相關產(chǎn)品:BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞 Hs 729.T細胞系相關產(chǎn)品:H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞 FHs74Int細胞系相關產(chǎn)品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞 PL-45細胞系相關產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞 H-2009細胞系相關產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞 TC7細胞系相關產(chǎn)品:KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞 SP2細胞系相關產(chǎn)品:CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞 TCC-PAN2細胞系相關產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞 M2-10B4細胞系相關產(chǎn)品:CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞 HEL細胞系相關產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞 Lu-165細胞系相關產(chǎn)品:HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞 FM88細胞系相關產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞 RSC96細胞系相關產(chǎn)品:PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞 A 2780 CP細胞系相關產(chǎn)品:SW-620細胞、SKNBE-1細胞、NCI-H1838細胞 751-NA細胞系相關產(chǎn)品:EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞 MOLT4細胞系相關產(chǎn)品:HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞 Dami細胞系相關產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞 KM-H2細胞系相關產(chǎn)品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞 RCF細胞系相關產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞 NT2/D1細胞系相關產(chǎn)品:H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞 VSMC細胞系相關產(chǎn)品:Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞 NCIH23細胞系相關產(chǎn)品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞 MIO-M1細胞系相關產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞 AR42J細胞系相關產(chǎn)品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞 SUDHL-5細胞系相關產(chǎn)品:MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞 SKMES1細胞系相關產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞 PL-12細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 SW-900細胞系相關產(chǎn)品:HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞 Hs 832(C).T細胞系相關產(chǎn)品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞 KPNRTBM1細胞系相關產(chǎn)品:32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞 EFM-192A epithelioid cells人乳腺癌細胞系 G361細胞系相關產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞 NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品:SU 86.86細胞、SKMEL3細胞、NK-92 MI細胞 P-815細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、SK-UT-1細胞、Human Kidney-2細胞 RBMVEC細胞系相關產(chǎn)品:DoTc2 4510細胞、FU-97細胞、LAN-5細胞 "
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