"Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細胞系
細胞背景資料：黑色素細胞；自發(fā)永生；C５７BL/６
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞
細胞生長：貼壁
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞
H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細胞系
A-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
LU-65M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
GOTO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
H-35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
SU 86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
OE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
BC-PAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞
WPE-int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
SupB15WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
EU-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
SK-RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞
SW1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細胞系
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2C12細胞、COLO 16細胞、MCF7-CTRL細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、B16 F10細胞、ZYM-DIEC02細胞
OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、COLO-320HSR細胞、JKT1細胞
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