"SIRC epithelioid cells兔角膜上皮細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:角膜;上皮細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞 PK(15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞 RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 SIRC epithelioid cells兔角膜上皮細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92_1_7細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞 Hela-mock細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-123細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞 FHL124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞 IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞 NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SIRC epithelioid cells兔角膜上皮細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞 HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞 SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞 NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞 HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞 MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞 R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞 SP-2/0-AG14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細(xì)胞、MN60細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞 BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞 SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞 SIRC epithelioid cells兔角膜上皮細(xì)胞系 293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞 GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞 373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞 3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞 JROECL21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsA-CL細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞 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293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞 HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞 SKMel-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 207細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞、A-498細(xì)胞 32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞 451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞 As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞 MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞 PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞 ESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞 ZYM-SVEC01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞 NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞 HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞 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