"HOP-62 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞背景資料:肺癌;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞 HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞 RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞 細胞生長:貼壁 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞 SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞 MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞 CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞 HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞 95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞 H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞 DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞 KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞 NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞 H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞 U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞 NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞 T84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細胞系 HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞 TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞 CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞 FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞 SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞 P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞 CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞 NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞 CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞 Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞 WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞 CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞 HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞 GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞 MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞 343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞 NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞 TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞 DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞 C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞 G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞 Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞 TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞 CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞 RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞 KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞 SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞 H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞 H-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞 NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞 HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞 SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞 MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞 BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞 28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞 SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞 Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞 TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞 MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞 SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞 OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞 HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞 NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞 LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞 RL-95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞 RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞 ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞 SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞 HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞 HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞 SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細胞系 Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞 IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細胞、CCD-841CoTr細胞、tdott細胞 HPBALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細胞、H-2342細胞、KNS62細胞 H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細胞、NCI-H146細胞、COLO 201細胞 "
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