"MIHA epithelioid cells正常人肝細胞系 細胞背景資料:肝 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 NCIH2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞 H-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞 AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞 細胞生長:貼壁 MIHA epithelioid cells正常人肝細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞 NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞 COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞 NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞 DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MIHA epithelioid cells正常人肝細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞 MUTZ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞 LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞 CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞 PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞 RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞 Capan2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞 OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞 HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞 MIHA epithelioid cells正常人肝細胞系 WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞 PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞 CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞 IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞 PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞 RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞 RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞 RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞 P-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞 PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞 MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞 Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞 Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞 HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞 L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞 CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞 SW780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞 KATO 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞 CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞 EL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞 801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞 EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞 Tn 5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞 H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞 P 3 HR 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞 KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞 SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞 KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞 TB1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞 EoL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞 HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞 MOLP-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞 RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞 DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞 NL20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞 NL20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞 P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞 RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞 MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞 SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞 Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞 Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞 McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞 D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞 NCI-SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞 TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞 F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞 HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞 MIHA epithelioid cells正常人肝細胞系 MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞 KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、HCC1954-BL細胞、PC3細胞 HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細胞、NCI-H460細胞、HEK293EBNA細胞 Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4細胞、PLMVEC細胞、WM266-4細胞 "
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