"mIMCD-3 epithelioid cells小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞系
細胞背景資料：腎；內(nèi)髓集合管；上皮細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
LWnt3A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
H2126細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
PLC/PRF/5細胞系相關產(chǎn)品：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
細胞生長：貼壁
mIMCD-3 epithelioid cells小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SkChA-1細胞系相關產(chǎn)品：CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
H1404細胞系相關產(chǎn)品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
WM266細胞系相關產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
U266S細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
EnCa1細胞系相關產(chǎn)品：K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
mIMCD-3 epithelioid cells小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
SKO3細胞系相關產(chǎn)品：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
H-1819細胞系相關產(chǎn)品：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
H1930細胞系相關產(chǎn)品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
NS-I/1細胞系相關產(chǎn)品：3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
H2087細胞系相關產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
HRVEC細胞系相關產(chǎn)品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
Nb2a細胞系相關產(chǎn)品：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
RMG1細胞系相關產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
ANA-1細胞系相關產(chǎn)品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
SKMEL3細胞系相關產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
mIMCD-3 epithelioid cells小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞系
U87-MG細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
GES-1細胞系相關產(chǎn)品：HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
H2073細胞系相關產(chǎn)品：253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
HCC1599細胞系相關產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
My-La 2059細胞系相關產(chǎn)品：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
INS1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
INS1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
NCI-H2073細胞系相關產(chǎn)品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞
VP 267細胞系相關產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
Sci-1細胞系相關產(chǎn)品：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
NCIH28細胞系相關產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
MESSA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
HCC1569細胞系相關產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
SW1417細胞系相關產(chǎn)品：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
KMST-6細胞系相關產(chǎn)品：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
WPE-int細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
Bovine Turbinate細胞系相關產(chǎn)品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
H-295R細胞系相關產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
MPASMC細胞系相關產(chǎn)品：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
IEC-18細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
LTEPsm細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
DoHH2細胞系相關產(chǎn)品：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
H-446細胞系相關產(chǎn)品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
PCI:SG231細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
SW839細胞系相關產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
SK_N_BE2C細胞系相關產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
SKG-IIIa細胞系相關產(chǎn)品：IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
Rat Skin 1細胞系相關產(chǎn)品：UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
Hep G2/C3A細胞系相關產(chǎn)品：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞
SUDHL10細胞系相關產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
PaCa2細胞系相關產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
DHL-4細胞系相關產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
HUT-28細胞系相關產(chǎn)品：P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
COLO-357細胞系相關產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
KY-270細胞系相關產(chǎn)品：B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
RASMCs細胞系相關產(chǎn)品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
EFO 27細胞系相關產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
CPA47細胞系相關產(chǎn)品：C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
WM 239A細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
Evsa-T細胞系相關產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
Alexander細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞
KNS-62細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
NCIH748細胞系相關產(chǎn)品：A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
NHRF細胞系相關產(chǎn)品：D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
Mahlavu細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
T.T細胞系相關產(chǎn)品：SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
mIMCD-3 epithelioid cells小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞系
HB611細胞系相關產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
SMMC-7721細胞系相關產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、OCILY3細胞、MODE-K細胞
SKNBE(2)細胞系相關產(chǎn)品：786-0WT細胞、AGS細胞、Vero 76 clone E6細胞
H-1915細胞系相關產(chǎn)品：S180細胞、SUM52細胞、NCI-H508細胞
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