"M-1 epithelioid cells小鼠腎集合管細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:腎集合管;SV40轉(zhuǎn)化 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞 NB1RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、H-1819細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞 D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 M-1 epithelioid cells小鼠腎集合管細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Panc_04_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細(xì)胞、J 111細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞 FHs74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞 769P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞 My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞 AAV-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P19細(xì)胞、A1847細(xì)胞、HECV細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 M-1 epithelioid cells小鼠腎集合管細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞 OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞 OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞 HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞 LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞 MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞 BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞 HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞 LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞 Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞 M-1 epithelioid cells小鼠腎集合管細(xì)胞系 Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87細(xì)胞、SNU761細(xì)胞、3396細(xì)胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞 NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞 SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞 L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞 HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞 HTori-3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7405細(xì)胞、TEC細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞 SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞 SW 756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G422細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞 U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞 NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞 CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞 PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞 Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞 MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞 NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞 THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞 ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞 M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞 HNEpC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-77細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞、C4-I細(xì)胞 3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞 bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞 MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞 SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞 HEK293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞 T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞 NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞 HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞 OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞 Lewis Lung Cancer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞 MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞 D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞 DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞 NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞 NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞 ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞 CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞 686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞 SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞 MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞 OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞 JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞 SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞 OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞 TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞 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