"CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:結(jié)腸癌;C57BL/ICRF 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 IEC-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞 MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞 Nthy-ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌,不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒(méi)有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞 HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞 MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞 V79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞 MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 H-2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞 OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞 NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞、KHYG細(xì)胞 H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞 HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞 SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞 Bx-PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、L78細(xì)胞 HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞 B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC7721細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞 UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系 HCV-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞 LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞 IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞 HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞 HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞 U-343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞 U-343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞 HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞 DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞 Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細(xì)胞、28SC細(xì)胞、LS-123細(xì)胞 Hs 737.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 F細(xì)胞、BT細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞 KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞 SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞 MPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細(xì)胞、H-1672細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞 HDMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895.T細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞 CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞 PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞 HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞 HCC-2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞 HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞 U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞 MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞 A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞 293 F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞、U87細(xì)胞 LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞 Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞 HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞 LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞 MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞 SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞 159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞 Panc_02_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-19細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞、KU1919細(xì)胞 MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞 COC1/CDDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81A-1細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞 REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞 WM115mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞 PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞 SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞 SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞 SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞 MPC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞 PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞 L M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT-7細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞、58F細(xì)胞 HT-1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞 MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞 U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細(xì)胞、JIII細(xì)胞、C8161細(xì)胞 Hs819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細(xì)胞、H-524細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞 PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞 MLFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、MM1細(xì)胞 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系 Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞 H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞 DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞 NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞 "
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