"Hs 578Bst epithelioid cells人正常乳腺細胞系 細胞背景資料:乳腺細胞 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞 SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞 253J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 細胞生長:貼壁 Hs 578Bst epithelioid cells人正常乳腺細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞 H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞 ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞 COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞 FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Hs 578Bst epithelioid cells人正常乳腺細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞 MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞 GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞 SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞 TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞 UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞 NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞 Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞 BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞 RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞 Hs 578Bst epithelioid cells人正常乳腺細胞系 DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞 SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞 BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞 QBC(939)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞 MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞 DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞 DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞 MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞 Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞 DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞 RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞 SVEC4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞 CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞 TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞 DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞 SUP-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞 PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞 WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞 NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞 HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞 Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞 J82 COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞 251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞 BC-3-H-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞 McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞 NPC-TW 039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞 GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞 KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞 HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞 TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞 SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞 Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞 NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞 CORL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞 ACCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞 ACCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞 HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞 Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞 MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞 OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞 PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞 NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞 SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞 C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞 U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞 HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞 rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞 Hs 578Bst epithelioid cells人正常乳腺細胞系 WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞 UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細胞、Hep-G2/C3A細胞、GM04680細胞 SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H498細胞、H226細胞、AG06814-N細胞 GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細胞、HT1080細胞、McG-1細胞 "
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