"HUVEC-C[HUVEC] epithelioid cells人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料：臍靜脈；內(nèi)皮細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
SJSA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
細胞生長：貼壁
HUVEC-C[HUVEC] epithelioid cells人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HUVEC-C[HUVEC] epithelioid cells人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
H-524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
ECC12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
HUVEC-C[HUVEC] epithelioid cells人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
FAO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
IGR.OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞
IGR.OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞
SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
HH [Human lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
MIN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
LNCaP-ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞
H9c2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞
H-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞
U87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞
JROECL21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
207細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
H2052_MM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
HEK-293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
SKCol1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
WM35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
Pt-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
GOTO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞
HUVEC-C[HUVEC] epithelioid cells人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細胞、H1838細胞、A-498細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細胞、R 1610細胞、U138-MG細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-60細胞、HD11細胞、HCEC細胞
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