"AtT-20 epithelioid cells小鼠垂體瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
AtT-20 epithelioid cells小鼠垂體瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測，而且它對(duì)細(xì)胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
U266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細(xì)胞、TM4細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞
H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞
HFF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、MB39細(xì)胞、H295R-S1細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
CACO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AtT-20 epithelioid cells小鼠垂體瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL4細(xì)胞、HT細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞
ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞
MHH-CALL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞
SW1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
UMRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞
KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞
NCI-H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
COLO679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EPC細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞、SCH細(xì)胞
AtT-20 epithelioid cells小鼠垂體瘤細(xì)胞系
251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2BS細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
NCIH250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH322細(xì)胞、8305-C細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞
TF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1-RGB細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞
LLC-MK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞
LLC-MK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞
CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
ARPE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞
PL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
Panc203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCH細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞
RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
NOZC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
MDAMB175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV-29細(xì)胞、CT-26細(xì)胞、WM451細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞
Y3.AG.1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞
32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞
H-2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-226細(xì)胞、Hs683細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞
NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
MEG01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞
LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
AtT-20 epithelioid cells小鼠垂體瘤細(xì)胞系
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、D-283細(xì)胞、SW626細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細(xì)胞、H1930細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
MHH-CALL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC細(xì)胞、A-673細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞
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