人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa檢測試劑盒實驗步驟具有高效、靈敏、特異的抗體;穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型等特點。
1(BLC-1/CXCL13)elisa檢測試劑盒實驗步驟: 1. 分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。人巨噬細胞趨化因子(MCF) 每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。輕輕晃動混勻,37℃溫育60分鐘。 2. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次,拍干。 3.人巨噬細胞趨化因子(MCF) 每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。 4.取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。 5.人巨噬細胞趨化因子(MCF) 測定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。 6.根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,人巨噬細胞趨化因子(MCF) 再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。
人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa檢測試劑盒操作注意事項: 1.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。 2.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。 3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。 4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。 5.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。 6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 7.加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。 8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 9.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
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