"FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞 RMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞 H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買(mǎi),培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類(lèi)型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱(chēng)為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。 細(xì)胞傳代方法:2-3天換液1次 LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞 SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞 RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞 OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞 FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 OCIAML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞 Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞 P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞 RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞 NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞 RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞 U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞 Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞 HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞 SW 1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細(xì)胞、P-388細(xì)胞、LTPA細(xì)胞 FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細(xì)胞系 Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞 A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞 U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞 NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞 NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞 KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞 KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞 JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞 LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞 SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞 HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞 HRC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細(xì)胞、HA1800細(xì)胞、MO59J細(xì)胞 AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞 McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞 D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞 BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞 KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞 SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞 BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞 MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞 HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞 HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞 HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞 NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞 NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞 ATDC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞 NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞 HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞 CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞 PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞 H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞 DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞 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