"Fao epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。 SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞 A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞 Toledo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細(xì)胞、H-295細(xì)胞、KP4細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 Fao epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正常現(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞 H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞 2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞、NCM460細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC PRF 5細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞、GM02219細(xì)胞 T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 Fao epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。 U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞 LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞 TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞 OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞 OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞 3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞 PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞 HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞 WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞 J82COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞 Fao epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞 SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞 CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞 3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞 HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞 SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞 SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞 SKO-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1833細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞、HKBML細(xì)胞 SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞 NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞 Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞 Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP 1細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞 HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞 COLO394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373 MG細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞、RGM1細(xì)胞 MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞 TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞 CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞 NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞 QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞 OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞 Hs600T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞、U20-S細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞 Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞 EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞 A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞 BERH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞 NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞 PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞 MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞 Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC VII細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞 HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞 TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞 MHCC97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞 GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞 FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞 MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞 J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞 LPC-H12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 42細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞 BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞 TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞 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