"COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細胞系

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。

MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞

L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞

D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞

細胞生長：貼壁

COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細胞系

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：２傳代

Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞

Plaepi 34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞

A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞

HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞

HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。

BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞

HCT116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞

MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞

CMT.64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞

HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞

578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞

SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞

OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞

H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞

MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞

COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細胞系

RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞

WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞

Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞

NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞

RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞

CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞

CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞

EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞

AD-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Hs 888Lu細胞

MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞

HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞

HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞

Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞

BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞

UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞

B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞

J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞

CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞

451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞

Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞

RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞

A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞

Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞

SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞

H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞

ECC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞

Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞

RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞

LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞

MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞

CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞

RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞

NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞

HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞

MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞

HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞

He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞

MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞

MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞

JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞

SF 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞

MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞

H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞

FU-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞

HEK293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞

Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞

FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞

TSCCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞

U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞

SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞

KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞

COLO 741 epithelioid cells人直腸癌細胞系

HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞

16-HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細胞、RCF細胞、ID8/MOSEC細胞

Earle's L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細胞、SKBR-3細胞、MDCC MSB1細胞

MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、OSKM-1細胞、DI TNC1細胞

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