"HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 KYSE 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞 OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞 NCI-H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:4-1:8?jìng)鞔?;每周換液2-3次。 Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞 HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞 BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞 SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng),偶爾上皮細(xì)胞液泡的形成 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞 Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞 MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞 L02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞、B958細(xì)胞 P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞 Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞 COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞 BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞 OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞 BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞 C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞 HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞 OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞 Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞 HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞 HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞 HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞 AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞 Hut292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H650細(xì)胞、GM3569細(xì)胞、H-841細(xì)胞 VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞 SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞 JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞 COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞 HCC-2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞 AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞 SU86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞 H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞 H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞 EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞 293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞 DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞 BDCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞 UT7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞 OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細(xì)胞、RK-13細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞 Colo-678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15WT細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞 GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞 Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞 U-2 OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞 WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞 THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞 TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞 GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞 QGY-7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞 MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞 SUM-149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞 HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞 HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞 SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞 VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞 NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞 PANC 1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEP2D細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞 OP9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞 RIN-m 14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1783細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞 MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞 HSC(Human Schwann)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞 LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞 Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞 Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞 HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞 HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞 HCC1428 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 CMT167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞 H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639 V細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞 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