"Becker epithelioid cells人腦星形膠質(zhì)細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞 IAR 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞 MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞 細胞生長:貼壁 Becker epithelioid cells人腦星形膠質(zhì)細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 SNU739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞 MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞 32D CL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞 ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞 SC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Becker epithelioid cells人腦星形膠質(zhì)細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞 WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞 IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞 MPC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞 Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞 H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞 NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞 SK-N-BE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞 C81-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞 LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞 Becker epithelioid cells人腦星形膠質(zhì)細胞系 T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞 MG-HU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞 CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞 Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞 6-T CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞 H-35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞 H-35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞 HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞 3T6 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞 G-292 clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細胞、NCIH244細胞、LLC1細胞 Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞 C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞 SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞 X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞 ACCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞 CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞 ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞 Hs934T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞 Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞 ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞 NCI-H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞 PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞 NCI-H1668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞 Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞 SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞 Y 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞 COLO 699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞 Tn5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞 SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞 L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞 JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞 SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞 Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞 J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞 NCI-H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞 NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞 LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞 WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞 PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞 WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞 P3/NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞 S3 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞 PC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞 TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞 2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞 RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞 RD-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞 Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞 KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 Becker epithelioid cells人腦星形膠質(zhì)細胞系 BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞 32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細胞、NCI-H196細胞、MCF-10 Attached細胞 DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-12T細胞、BE(2)-M17細胞、GM637A細胞 IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、NCI-H2085細胞、MC3T3-E1(C4)細胞 "
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