"SK-ES-1 epithelioid cells肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞 NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞 HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 SK-ES-1 epithelioid cells肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:5傳代;每周換液2-3次 A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞 LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞 NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞 NCI-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞 CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SK-ES-1 epithelioid cells肉瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞 TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞 NCIH1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞 MUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞 R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞 PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞 SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞 U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞 Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞 COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞 SK-ES-1 epithelioid cells肉瘤細(xì)胞系 NCI-H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞 P3JHR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞 Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞 4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞 COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞 OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞 A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞 PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞 LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞 NCIH1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞 QGY-7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞 NCIH2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞 HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞 RFL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞 HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞 HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞 CCRF CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81-1細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞 VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞 NP-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞 RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞 NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞 SNU-368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細(xì)胞、MS 751細(xì)胞、5-8F細(xì)胞 SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞 PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞 Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞 OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞 OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞 SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞 SuDHL 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