"Kuramochi epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 RCC23細胞系相關產品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞 P31 FUJ細胞系相關產品:MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞 H-1568細胞系相關產品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞 細胞生長:貼壁 Kuramochi epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內,依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:10傳代;每周換液2-3次 KYSE 520細胞系相關產品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞 NCI-H1930細胞系相關產品:TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞 LC-1Sq細胞系相關產品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞 SV40-HCEC細胞系相關產品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞 FRO 81-2細胞系相關產品:hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 Kuramochi epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 HCC0078細胞系相關產品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞 NCI-H647細胞系相關產品:HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞 CMT64細胞系相關產品:LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞 LY-R細胞系相關產品:EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞 1301細胞系相關產品:L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞 CAL148細胞系相關產品:Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞 KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關產品:BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞 NMCG-1細胞系相關產品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞 Capan1細胞系相關產品:SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞 KP-N-RT細胞系相關產品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞 Kuramochi epithelioid cells人卵巢癌細胞系 C8166-CD4細胞系相關產品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞 CCRF-CEM/S細胞系相關產品:Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞 SK-BR-3細胞系相關產品:KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞 TOV21G細胞系相關產品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞 SW 1116細胞系相關產品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞 HCT116細胞系相關產品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞 HCT116細胞系相關產品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞 MC9細胞系相關產品:CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞 NCI-H2195細胞系相關產品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞 HSAS1細胞系相關產品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞 ADR-RES細胞系相關產品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞 U-373MG細胞系相關產品:Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞 Hs940-T細胞系相關產品:NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞 MAC1細胞系相關產品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞 Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關產品:GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞 H1954細胞系相關產品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞 A-101D細胞系相關產品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞 Earle's L cells細胞系相關產品:MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞 Earle's L cells細胞系相關產品:MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞 AR41P細胞系相關產品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞 SKNBE2C細胞系相關產品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞 LOUNH91細胞系相關產品:CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞 HT22細胞系相關產品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞 SW1088細胞系相關產品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞 PCI-4M細胞系相關產品:hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞 RC-2細胞系相關產品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞 MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞 159PT細胞系相關產品:NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞 Saos2細胞系相關產品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞 SKNBE2C細胞系相關產品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞 NCI-H2171細胞系相關產品:AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞 SHG44細胞系相關產品:HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞 DMS 53細胞系相關產品:CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞 SW948細胞系相關產品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞 MIA-Pa-Ca-2細胞系相關產品:451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞 Hs 281.T細胞系相關產品:COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞 RPE-hTERT細胞系相關產品:alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞 Murine Lung Epithelial-12細胞系相關產品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞 AHH-1細胞系相關產品:Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞 JROECL 21細胞系相關產品:KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞 H-358細胞系相關產品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞 SKNBE2C細胞系相關產品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞 RPMI 8226/S細胞系相關產品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞 b.End3細胞系相關產品:Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞 KYSE 510細胞系相關產品:NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞 SKLU01細胞系相關產品:WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞 Tn5 B1-4細胞系相關產品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞 Okayama University Medical School-27細胞系相關產品:EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞 U118-MG細胞系相關產品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞 MKN-7細胞系相關產品:KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞 Kuramochi epithelioid cells人卵巢癌細胞系 H1522細胞系相關產品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞 SMMC 7721細胞系相關產品:EBNA293細胞、KTC-1細胞、SCC-7細胞 SK-NMC細胞系相關產品:Swiss 3T6細胞、32Dcl3細胞、NCI-H526細胞 CMT64細胞系相關產品:LN382細胞、BPH1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞 "
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