"LTPA epithelioid cells小鼠胰腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞 LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞 EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞 細胞生長:貼壁 LTPA epithelioid cells小鼠胰腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2傳代 Hs675細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞 COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞 HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞 hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞 C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 LTPA epithelioid cells小鼠胰腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞 KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞 KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞 H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞 B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞 ChaGo K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH1細胞、HIT clone T15細胞、KYSE 510細胞 SW-1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞 FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞 HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞 LTPA epithelioid cells小鼠胰腺癌細胞系 KMST-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞 COV434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞 JiyoyeP-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞 MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞 HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞 HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞 SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞 N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞 H-2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞 OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞 MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞 MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞 2PK-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞 HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞 JEKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞 HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞 MRCV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞 HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞 HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞 Kit 225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞 CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞 P-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞 C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞 REC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞 NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞 SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞 NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞 TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞 FK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞 HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞 Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞 C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞 HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞 P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞 Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞 H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞 HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞 HEK-AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞 A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞 PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞 LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞 LA4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞 MDAMB175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞 University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞 HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞 Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞 USMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞 SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞 RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 LTPA epithelioid cells小鼠胰腺癌細胞系 WM266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞 HEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細胞、FRO 81-2細胞、NEC8細胞 HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dcl3細胞、SCL2細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞 KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細胞、PF382細胞、HOC-1細胞 "
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