"RGC-5 epithelioid cells小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! Ramos細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞 rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞 CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞 細胞生長:貼壁 RGC-5 epithelioid cells小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴(yán)重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞 CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞 RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞 NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞 HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 RGC-5 epithelioid cells小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞 PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞 SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞 OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞 J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞 H-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細胞、MV4II細胞、P388細胞 UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞 NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞 JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞 HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞 RGC-5 epithelioid cells小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞系 SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞 HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞 AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞 BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞 CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞 MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞 Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞 D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞 BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞 NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞 DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞 Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞 MRC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞 OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞 CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞 SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞 CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞 HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞 MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞 3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞 H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞 NCI-H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞 8305C_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞 MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞 BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞 HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞 PAI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞 MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞 H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞 OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞 MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞 HUCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞 2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞 Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞 PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞 HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞 MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞 DITNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞 RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞 KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞 A549-Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞 RGC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞 H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞 LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞 KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞 Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞 Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞 HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞 RGC-5 epithelioid cells小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞系 NCIH1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞 HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細胞、NCI-H187細胞、Pa17C細胞 hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、Bovine Turbinate細胞、RKOAS451細胞 SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、HARA-B細胞、GS-9L細胞 "
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