"B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源于C５７BL/６J小鼠黑色素瘤，可以產(chǎn)生黑色素，同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
H-3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞
DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
RCC_7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、OLN93細(xì)胞
NCI-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：梭形
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
WEHI164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞
BT 325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP-37細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞
NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞
SHI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24(ECV304)細(xì)胞、C32r細(xì)胞、A 172細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
RPMI8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TERT-RPE1細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞
MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
T47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞
CCC-HIE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細(xì)胞、293 H細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
SK-MES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞、Simpson細(xì)胞
U87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞
Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
SKMEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞
SW954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、HCC15細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
U-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞
PANC0813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
J.E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
H-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-661細(xì)胞、CAL62細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞
alpha TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalva細(xì)胞、H-1688細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞
RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞
COLO206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NP-69細(xì)胞
LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-FI細(xì)胞、H146細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞
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