"HPAC epithelioid cells人胰腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞 RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞 RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞 細胞生長:貼壁 HPAC epithelioid cells人胰腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2傳代 Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞 INS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞 LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞 P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞 SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HPAC epithelioid cells人胰腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞 F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞 NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞 675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞 D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞 GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞 BT474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞 X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞 alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞 SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 HPAC epithelioid cells人胰腺癌細胞系 NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞 SHG-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4細胞、A253細胞、SF295細胞 ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞 CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞 ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞 NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞 NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞 C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞 MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞 BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞 Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞 BOWES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞 D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞 COLO 680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞 CV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞 NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞 HOS-143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞 Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞 PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞 EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞 NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞 H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞 LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞 Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞 LS-1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞 Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞 NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞 SVEC 4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞 DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞 ES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞 MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞 RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞 HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞 N9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞 Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞 HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞 KASUMI6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞 Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞 H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞 P30/0HK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞 M059J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞 YES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞 Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞 SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞 D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞 UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞 MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞 Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞 YD15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞 HPAC epithelioid cells人胰腺癌細胞系 NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞 NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、CAL 120細胞 C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander cells細胞、UMUC-3細胞、CCRF細胞 NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細胞、B4G12細胞、TE6細胞 "
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