"BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細胞系 細胞背景資料:這個細胞株不表達囊腫性纖維化跨膜電導調(diào)節(jié)子(CFTR)。CFTR陽性的細胞株是Capan-1(ATCCHTB-79)。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞 MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞 RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞 細胞生長:貼壁 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:消化5-10分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞 U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 COLO_320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞 OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞 RL-95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 CAL 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞 MM1.S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞 Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞 Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞 NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞 HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞 LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞 DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞 NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR細胞、He La細胞、TE14細胞 HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細胞系 DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞 C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞 T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞 TOV112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞 Hs 281.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞 NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞 NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞 P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞 hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞 M-O7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞 DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞 Hep 3B2_1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞 NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞 TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞 FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞 Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞 Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞 Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞 MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞 M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞 CCRFCEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞 RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞 SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞 MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞 EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 NCI-SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞 ZR75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞 SPCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞 McG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞 MRC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞 LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞 MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞 SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞 H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞 HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞 NCI-H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞 Tn 5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞 ZR7530細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞 VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞 MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞 N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞 NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞 Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞 SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞 GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞 IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞 Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞 TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞 RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細胞系 LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞 TO175T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細胞、CLONE M3細胞、HEK-293-FT細胞 V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細胞、BNL.CL2細胞、MMAc.SF細胞 Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細胞、SV40-MES13細胞、CX-1細胞 "
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