"KP-N-NS epithelioid cells人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2a細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、K-562細(xì)胞 SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞 AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 KP-N-NS epithelioid cells人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞 GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞 HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞 GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞 AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 KP-N-NS epithelioid cells人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗室。 H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞 P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞 Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞 SUM190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞 KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞 HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞 NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞 SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞 HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞 GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞 KP-N-NS epithelioid cells人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞 FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞 M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞 PK(15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞 B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞 NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞 NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞 4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞 L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞 OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞 LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞 SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞 MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞 McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞 HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞 OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞 Cor L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞 Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞 MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞 LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞 CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞 SK-N-FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞 RBL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞 HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞 H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞 NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞 H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞 NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞 Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞 MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞 MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞 Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞 Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞 NCIH727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-N87細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞、SW1573細(xì)胞 MARC145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞 HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞 GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞 OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞 Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞 AAV-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P19細(xì)胞、A1847細(xì)胞、HECV細(xì)胞 F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞 B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞 343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞 Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞 Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞 PE/CA-PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT-T15細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞 H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞 MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞 BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞 MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞 A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞 KP-N-NS epithelioid cells人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞 HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、JHH7細(xì)胞 A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLM細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、Tu177細(xì)胞 Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、H-35細(xì)胞、COV-362細(xì)胞 "
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