"KP-N-NS Cell:人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤。 MPC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞 XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞 MHCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細(xì)胞、H2110細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞 SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 KP-N-NS Cell:人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細(xì)胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細(xì)胞,易生長的細(xì)胞加少一點培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細(xì)胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細(xì)胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細(xì)胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細(xì)胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞 M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞 Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞 NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞 GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 KP-N-NS Cell:人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞 Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞 RL95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 166細(xì)胞、GM03570細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞 F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞 MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞 K1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞、LI7細(xì)胞 PANC0504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細(xì)胞、HIT細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞 KP-N-NS Cell:人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 CEM-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞 T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞 HEK293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343-MG細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞 H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞 Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞 R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞 H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞 P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞 BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、751-NA細(xì)胞 P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞 H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞 IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞 YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞 MLMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞 HPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-3細(xì)胞、H2198細(xì)胞、YES2細(xì)胞 H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞 HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細(xì)胞、HuT78細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞 SV-HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞 Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞 BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞 SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞 Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞 PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞 DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞 KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞 MiaPaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞 COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞 G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞 SW948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-5細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞 HONE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞 HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞 HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞 C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞 LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞 HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞 H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞 Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞 MDA-MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞 C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞 NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞 WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 SK Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324MED細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞 3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞 KP-N-NS Cell:人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞 HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞 H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞 HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞 CCD 841 CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細(xì)胞、CHP212細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞 ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞 GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM38細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞 P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞 KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞 SNU-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞 PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞 NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞 "
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