"SK-N-BE(2) epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：１９７２年１１月從一們多次化療及放療的擴散性神經(jīng)母細胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(２)神經(jīng)母細胞瘤細胞株。 該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 有報道稱SK-N-BE(２)細胞的飽和濃度超過１x１０６細胞/平方厘米。細胞形態(tài)多樣，有的有長突觸，有的呈上皮細胞樣。 細胞會聚集，形成團塊并浮起
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
OVCAR4細胞系相關產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
HEH2細胞系相關產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
SEM細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
細胞生長：貼壁
SK-N-BE(2) epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２傳代
H-1693細胞系相關產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
HCCC9810細胞系相關產(chǎn)品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
U-373 MG細胞系相關產(chǎn)品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SK-N-BE(2) epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
NCIH1944細胞系相關產(chǎn)品：KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
Wistar Institute-38細胞系相關產(chǎn)品：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
IPEC1細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
SK Mel 24細胞系相關產(chǎn)品：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
KM-12細胞系相關產(chǎn)品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
OACP4 C細胞系相關產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
C643細胞系相關產(chǎn)品：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
UMUC1細胞系相關產(chǎn)品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關產(chǎn)品：RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
H4-II-EC3細胞系相關產(chǎn)品：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
SK-N-BE(2) epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
OCLY8細胞系相關產(chǎn)品：PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
H1651細胞系相關產(chǎn)品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
SK-ES1細胞系相關產(chǎn)品：HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
LM6細胞系相關產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
Hs27F細胞系相關產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
Hs27F細胞系相關產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
H-711細胞系相關產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
NCIH378細胞系相關產(chǎn)品：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
H-2342細胞系相關產(chǎn)品：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞
BSC40細胞系相關產(chǎn)品：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
MDA231細胞系相關產(chǎn)品：JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
HCC9204細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
UCH1細胞系相關產(chǎn)品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
YD38細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
SK BR 03細胞系相關產(chǎn)品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
H-7721細胞系相關產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
LICR-HN-6細胞系相關產(chǎn)品：MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
HCET細胞系相關產(chǎn)品：NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
KYSE450細胞系相關產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
CCD1095Sk細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
Me Wo細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
SJSA1細胞系相關產(chǎn)品：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
CAL 12T細胞系相關產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
MARC 145細胞系相關產(chǎn)品：CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
NCIH747細胞系相關產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
TE9細胞系相關產(chǎn)品：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞
VMM39細胞系相關產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
SKMel-28細胞系相關產(chǎn)品：Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞
LS 123細胞系相關產(chǎn)品：LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
KAT-5細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
H650細胞系相關產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
HNE1細胞系相關產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
PANC 203細胞系相關產(chǎn)品：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
MV522細胞系相關產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
MG-HU-3細胞系相關產(chǎn)品：TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
NCI-H596細胞系相關產(chǎn)品：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
IAR-20細胞系相關產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
PK(15)細胞系相關產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
Huh 7.5細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
MS1細胞系相關產(chǎn)品：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
OB2細胞系相關產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
ECC 10細胞系相關產(chǎn)品：LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
ECV 304細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
H1792細胞系相關產(chǎn)品：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
SK-N-BE(2) epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
HPAF/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
OVCAR10細胞系相關產(chǎn)品：U 937細胞、DAKIKI Clone 1細胞、AML193細胞
SW-1573細胞系相關產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細胞、X63.Ag8.653細胞、SNU182細胞
IPEC-1細胞系相關產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、NCI-H647細胞、EoL-1細胞
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