"67NR Cell:小鼠乳腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:乳腺癌;BALB/cfC3H
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
NCI-H441-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
67NR Cell:小鼠乳腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WEHI 164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
MESSA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
細胞生長特性:貼壁
67NR Cell:小鼠乳腺癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
MDCK II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
RAW264細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
67NR Cell:小鼠乳腺癌細胞系
HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
NCI-H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞
hFOB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
A375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞
SKNF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞
PL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
ECC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
SCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
ZR-75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
Calu3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
HMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
HCC1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-829細胞、3T6細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞
COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞
H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞
WM451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
67NR Cell:小鼠乳腺癌細胞系
LAN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
FD-LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI-TNC1細胞、624mel細胞、C3H-10T1/2細胞
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