"67NR epithelioid cells小鼠乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:乳腺癌;BALB/cfC3H 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿(mǎn)意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞 BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞 ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 67NR epithelioid cells小鼠乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱(chēng)為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴(lài)于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱(chēng)為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞 DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞 P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞 3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞 H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 67NR epithelioid cells小鼠乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專(zhuān)用儀器設(shè)備以及專(zhuān)用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專(zhuān)用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類(lèi)似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! HEC-1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞 MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞 NCIH292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞、BRL細(xì)胞 MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞 16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞 MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞 IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞 Hs 675.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PanC1細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞、NHEK細(xì)胞 NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞 67NR epithelioid cells小鼠乳腺癌細(xì)胞系 CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞 V 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Liver-02細(xì)胞、LS 123細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞 SW 1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞 KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞 NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞 3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞 3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞 KATO 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞 SW 480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞 Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞 RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞 OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞 HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞 PLC8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞 P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞 K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞 H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞 32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞 NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞 PT-67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞 H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞 H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞 ACT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2-Ad細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、H1688細(xì)胞 HCC1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞、A-673細(xì)胞 HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞 Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞 639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞 HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞 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cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞 COLO 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞 OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、PL 45細(xì)胞 NCIH292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細(xì)胞、MJ細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞 "
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