"TJ905 Cell:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:膠質(zhì)瘤
BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞
Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞
NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TJ905 Cell:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
AHH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOTO細(xì)胞、DKMG細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞
MKN-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12 SM細(xì)胞、108CC15細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
TJ905 Cell:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
PLA801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞
KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
HcerEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
TJ905 Cell:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
EOC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細(xì)胞、HRMC細(xì)胞、CORL23細(xì)胞
SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞
YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
CTLA4Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-H細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞、A2008細(xì)胞
TE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2228細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、Med 341細(xì)胞
Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞
B16F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞
B16F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
GP2d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細(xì)胞、GM2131細(xì)胞、GM637細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1618細(xì)胞、NBLS細(xì)胞、TGW細(xì)胞
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細(xì)胞、PC9細(xì)胞、CEL細(xì)胞
3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
CHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞
H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
TJ905 Cell:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞
Hep 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞
IA-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細(xì)胞、H2009細(xì)胞、H-220細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
NCIH2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA-Dx5細(xì)胞、OE-21細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
CAL148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895T細(xì)胞、QG-56細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞
CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細(xì)胞、A 375細(xì)胞、ACC2細(xì)胞
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關(guān)鍵字: TJ905 Cell:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
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