"Ect1/E6E7 Cell:人宮頸永生化鱗狀細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:宮頸;女性;HPV-16轉化
Beta-TC-6細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
SKLMS1細胞系相關產(chǎn)品:SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
Leukemic 1210細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
J-774A.1細胞系相關產(chǎn)品:CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Ect1/E6E7 Cell:人宮頸永生化鱗狀細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LYR細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
EFM192A細胞系相關產(chǎn)品:X63-Ag8-653細胞、HSC(Human Schwann)細胞、SU-DHL-8細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關產(chǎn)品:HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
H-2342細胞系相關產(chǎn)品:HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞
MAVER細胞系相關產(chǎn)品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
細胞生長特性:貼壁
Ect1/E6E7 Cell:人宮頸永生化鱗狀細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
NCI-H1666細胞系相關產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
N-2a細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
H-82細胞系相關產(chǎn)品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
LM TK negative細胞系相關產(chǎn)品:SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
174xCEM.T2細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
SW 527細胞系相關產(chǎn)品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
Ect1/E6E7 Cell:人宮頸永生化鱗狀細胞系
RK-13細胞系相關產(chǎn)品:CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產(chǎn)品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
PAMC82細胞系相關產(chǎn)品:mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
C3H/10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
NCIH378細胞系相關產(chǎn)品:COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
U-373MG細胞系相關產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
JEKO細胞系相關產(chǎn)品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
OVCAR.5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
DoHH-2細胞系相關產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
DoHH-2細胞系相關產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
JS1細胞系相關產(chǎn)品:786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
PC14細胞系相關產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
H-2170細胞系相關產(chǎn)品:WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
H3396細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
EBC-1細胞系相關產(chǎn)品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
P30OHK細胞系相關產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
Ly3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
Hs695T細胞系相關產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞
C4I細胞系相關產(chǎn)品:V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
P-388D1細胞系相關產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關產(chǎn)品:H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
KRC/Y細胞系相關產(chǎn)品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
NEC細胞系相關產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
HEK 293細胞系相關產(chǎn)品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
RKOAS451細胞系相關產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞
NCI-SNU-423細胞系相關產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
H-508細胞系相關產(chǎn)品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
CA922細胞系相關產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
CEM/0細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
CL 1-0細胞系相關產(chǎn)品:HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
HCC1954 BL細胞系相關產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關產(chǎn)品:ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
HSC3細胞系相關產(chǎn)品:Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
ACC-M細胞系相關產(chǎn)品:MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
COLO320DM細胞系相關產(chǎn)品:GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
COLO 738細胞系相關產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
MDA134細胞系相關產(chǎn)品:RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
L 540細胞系相關產(chǎn)品:JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞
NCIH1568細胞系相關產(chǎn)品:THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
Ect1/E6E7 Cell:人宮頸永生化鱗狀細胞系
OCILY10細胞系相關產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
PG-4細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
RM1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
RS 4;11細胞系相關產(chǎn)品:MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
CAL27細胞系相關產(chǎn)品:MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
PaTu8988s細胞系相關產(chǎn)品:Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
hTERT RPE-1細胞系相關產(chǎn)品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
RPMI 2650細胞系相關產(chǎn)品:JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞
MC 116細胞系相關產(chǎn)品:GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
VMCUB1細胞系相關產(chǎn)品:H-508細胞、SKLMS1細胞、LoMeT-ccRcc細胞
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關鍵字: Ect1/E6E7 Cell:人宮頸永生化鱗狀細胞系
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