"HEK293-A Cell:腺病毒包裝人胚腎細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:胚腎;腺病毒包裝
MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
Evsa T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HEK293-A Cell:腺病毒包裝人胚腎細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Tu-177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
PC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
細胞生長特性:貼壁
HEK293-A Cell:腺病毒包裝人胚腎細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
MGH-U1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
KATO III細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
HEK293-A Cell:腺病毒包裝人胚腎細胞系
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
NK 10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
PC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
HDF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞
MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
LLCPK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
LC1/Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞
NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
HEK293-A Cell:腺病毒包裝人胚腎細胞系
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
BLO-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細胞、SNU-878細胞、SUM 52PE細胞
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