"CHL/IU Cell:中國倉鼠肺細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
Caco 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞、FRO細(xì)胞
H-2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞
SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞
OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CHL/IU Cell:中國倉鼠肺細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW-948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1573細(xì)胞、CL-34細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞
NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞
L2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D562細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
CHL/IU Cell:中國倉鼠肺細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
EBC-1/original細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
K7M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞
H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞
CHL/IU Cell:中國倉鼠肺細(xì)胞系
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞
JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞
MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
NRK clone 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322T細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞、OE21細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞
BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
CZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞、HMC細(xì)胞
GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞
NCIH378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
Fetal Human Colon細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、SR786細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451-LU細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
CATH.a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞
IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
HCT 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
HCC1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA420細(xì)胞、GM03569細(xì)胞、COV-434細(xì)胞
kms 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hopkins-92細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞、H-1155細(xì)胞
159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2122細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞
ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞
BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞
Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
EL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞
CHL/IU Cell:中國倉鼠肺細(xì)胞系
LYR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL6細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、HSC6細(xì)胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
COLO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞
CHP 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-23細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞
COLO-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1105細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞
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