"NCI-H295 Cell:人腎上腺皮質(zhì)癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H295 Cell:人腎上腺皮質(zhì)癌細胞系
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之；支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義；偵測出細胞株有支原體污染時，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值會越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
SF-539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
NCI-H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
Hs-695-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
BT483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
NCI-H295 Cell:人腎上腺皮質(zhì)癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HepaRG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
NCI-H295 Cell:人腎上腺皮質(zhì)癌細胞系
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞
9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞
FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
OCI-Ly01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
Panc02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
WEHI-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞
KLN 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
NCI-H295 Cell:人腎上腺皮質(zhì)癌細胞系
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
BV-173細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞
LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-295細胞、NK62a細胞、BT-B細胞
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