"C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該永生化細(xì)胞系源自出生８天小鼠小腦組織，由B Pessac, D Trisler建立。該細(xì)胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特征。該細(xì)胞為GFAP陽(yáng)性細(xì)胞，除此之外，沒(méi)有檢測(cè)到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的分子標(biāo)記。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
GM-3573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
HOP 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞
RAOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞、H-1355細(xì)胞
373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624 MEL細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞、HMEL細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細(xì)胞、211H細(xì)胞、BE2C細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細(xì)胞系
PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
MTEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1833細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞、HS-294細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞
PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞
MO59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞
SK-RC 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
ATN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細(xì)胞、GM-215細(xì)胞、H-727細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、H740細(xì)胞
PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
SKNBE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb 1細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
HT-29/CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞、HL60細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞
Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞
LNCaP clone FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、H2330細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞
H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-2664細(xì)胞、HcaF細(xì)胞、GM01232細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
ZR7530細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2-BBE細(xì)胞、293-F細(xì)胞、H-1092細(xì)胞
MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞
Panc-327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細(xì)胞、SN12C細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞
Nthy-ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞
ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞
LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞
TE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
LN 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMVEC細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞
SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細(xì)胞、KG-1細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細(xì)胞系
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、HSC細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞
RAOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、LN229細(xì)胞
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