"TK-10 Cell:人腎癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
SCCVII/St細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞
CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
TK-10 Cell:人腎癌細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；２-３天換液１次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
H-2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
細胞生長特性：貼壁生長
TK-10 Cell:人腎癌細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
TK-10 Cell:人腎癌細胞系
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
LIM-1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
MDA-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
BHK21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
KM-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
TO175T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
OCI/AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
TK-10 Cell:人腎癌細胞系
L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
AAV293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2_03細胞、SKES1細胞、G-401細胞
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