"TK-10 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
RMS 13細胞系相關產品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
ARO 81-1細胞系相關產品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
Caco-2 BBe細胞系相關產品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
細胞生長：貼壁
TK-10 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；２-３天換液１次。
Karpas-299細胞系相關產品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
GM346細胞系相關產品：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
NCI-SNU-520細胞系相關產品：SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
NK-92細胞系相關產品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
XWLC-05細胞系相關產品：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TK-10 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮樣
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
AsPC-1細胞系相關產品：MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞
Cor L51細胞系相關產品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
MDST8細胞系相關產品：NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞
NCIH1623細胞系相關產品：MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關產品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
SCC VII細胞系相關產品：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
SUM-149細胞系相關產品：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關產品：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
IMR-32細胞系相關產品：BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞
CT26-clone 25細胞系相關產品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
TK-10 epithelioid cells人腎癌細胞系
SKMEL2細胞系相關產品：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
TGW-nu-1細胞系相關產品：Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
H2291細胞系相關產品：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關產品：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
NTera 2細胞系相關產品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
MUVEC細胞系相關產品：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
MUVEC細胞系相關產品：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
SMMC 7721細胞系相關產品：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞
BE(2)M17細胞系相關產品：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
MLMA細胞系相關產品：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
COLO320DM細胞系相關產品：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
R-1059-D細胞系相關產品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
Gerner 7666細胞系相關產品：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
DSL6A/C1細胞系相關產品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
GOS3細胞系相關產品：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
Tn 5B1-4細胞系相關產品：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
hTERT RPE1細胞系相關產品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
U-CH1細胞系相關產品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
L6細胞系相關產品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
Mel-RM細胞系相關產品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
KMY1022細胞系相關產品：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
SU-DHL-2細胞系相關產品：KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞
T98-G細胞系相關產品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
PLB-985細胞系相關產品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
BEL 7404細胞系相關產品：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
NCIH1105細胞系相關產品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
SW-962細胞系相關產品：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
Walker 256細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
HUT 125細胞系相關產品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
3T3-L1細胞系相關產品：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
CEM-T4細胞系相關產品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
HUVEC細胞系相關產品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
SW-1271細胞系相關產品：HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
TFK-1細胞系相關產品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
MILE SVEN1細胞系相關產品：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
HBSMC細胞系相關產品：Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞
Cor L88細胞系相關產品：NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
WM-239A細胞系相關產品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
WM-239A細胞系相關產品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
OVCA 432細胞系相關產品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
NCIH1915細胞系相關產品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
H2227細胞系相關產品：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
Pa17C細胞系相關產品：H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
SNU-475細胞系相關產品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
H1568細胞系相關產品：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
MHCC97H細胞系相關產品：Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
95D細胞系相關產品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
RPE-1細胞系相關產品：Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
SK-Mel 2細胞系相關產品：GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關產品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
CG4細胞系相關產品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
TK-10 epithelioid cells人腎癌細胞系
H341細胞系相關產品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
PECAPJ34細胞系相關產品：BT細胞、NCIH2106細胞、D283 Med細胞
Panc-02細胞系相關產品：UM-UC3細胞、MB231細胞、HTR-8/SV-neo細胞
MDST8細胞系相關產品：NCIH2286細胞、H1341細胞、VMM5A細胞
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