"NCI-H1836 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
X63-AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1836 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Vero E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
細胞生長特性:懸浮生長
NCI-H1836 Cell:人小細胞肺癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
NCI-H1836 Cell:人小細胞肺癌細胞系
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
UWB1-289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
LAD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
T. T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
ASH-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
HPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
SN-12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
HS-695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
NCI-H1836 Cell:人小細胞肺癌細胞系
HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞
OCI Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU451細胞、WM-239A細胞、MDA-175細胞
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