"NCI-H1836 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 CBRH7919細胞系相關產(chǎn)品:CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞 H2073細胞系相關產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞 P3X63 AG 8.653細胞系相關產(chǎn)品:C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H1836 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:每周換液2-3次。 Duke University 145細胞系相關產(chǎn)品:M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞 WSU-DLCL-2細胞系相關產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞 SUM102PT細胞系相關產(chǎn)品:H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞 4T1細胞系相關產(chǎn)品:BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞 DV90細胞系相關產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H1836 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 C8-D1A細胞系相關產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 SUM149-PT細胞系相關產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞 LS174T細胞系相關產(chǎn)品:Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞 HFL 1細胞系相關產(chǎn)品:MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞 SF 539細胞系相關產(chǎn)品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞 KU 812細胞系相關產(chǎn)品:A9 (Hamprecht)細胞、SK-MEL-28細胞、SKUT-1細胞 QGP1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞 HRA-19細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞 KASUMI1細胞系相關產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞 IR 983F細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞 NCI-H1836 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 SKO3細胞系相關產(chǎn)品:143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞 3AO細胞系相關產(chǎn)品:TH1細胞、H711細胞、RN細胞 SNU-182細胞系相關產(chǎn)品:B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞 MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關產(chǎn)品:SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞 A 72細胞系相關產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞 H1435細胞系相關產(chǎn)品:Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞 NCI-H660細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞 HIBEC細胞系相關產(chǎn)品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞 UCD-MLA-144細胞系相關產(chǎn)品:SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞 Hca-F細胞系相關產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞 EBC-1細胞系相關產(chǎn)品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞 HCT-8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞 Ramos 2G6.4C10細胞系相關產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞 NCI-H28細胞系相關產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞 M210B4細胞系相關產(chǎn)品:BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞 SK LU 1細胞系相關產(chǎn)品:EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞 SW839細胞系相關產(chǎn)品:RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞 BC-025細胞系相關產(chǎn)品:Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞 253J細胞系相關產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 FU-MMT-1細胞系相關產(chǎn)品:KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞 NCIH2141細胞系相關產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞 Jurkat-E6細胞系相關產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞 NCIH2171細胞系相關產(chǎn)品:CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞 HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞 HCC-366細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞 ESC-410細胞系相關產(chǎn)品:HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞 HOS-TE85細胞系相關產(chǎn)品:SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞 TCam-2細胞系相關產(chǎn)品:SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞 B16-F0細胞系相關產(chǎn)品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞 PLA 802細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞 LU451細胞系相關產(chǎn)品:J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞 COV434細胞系相關產(chǎn)品:SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞 F9細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞 NCI-H508細胞系相關產(chǎn)品:293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞 S16細胞系相關產(chǎn)品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞 WRL-68細胞系相關產(chǎn)品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞 VeroC1008細胞系相關產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞 HEL9217細胞系相關產(chǎn)品:Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞 Vero 76 clone E6細胞系相關產(chǎn)品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞 COLO 824細胞系相關產(chǎn)品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞 SK-MEL-5細胞系相關產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞 ZYM-DIEC02細胞系相關產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞 HCC1419細胞系相關產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞 T98細胞系相關產(chǎn)品:SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞 NS20Y細胞系相關產(chǎn)品:MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞 RA 1細胞系相關產(chǎn)品:NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞 CAL 12T細胞系相關產(chǎn)品:HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞 AHH1細胞系相關產(chǎn)品:GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞 NCIH209細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞 NCI-SNU-216細胞系相關產(chǎn)品:KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞 ABC1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞 NCI-H1836 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 NCl-H157細胞系相關產(chǎn)品:BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞 M619細胞系相關產(chǎn)品:H498細胞、Psi2-DAP細胞、NCI-H1568細胞 Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關產(chǎn)品:WM-239細胞、LC-1 sq細胞、rRTEC細胞 LS174T細胞系相關產(chǎn)品:Rat Lung-65細胞、SHIN-3細胞、MeWo細胞 "
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