"Rca-B Cell:大鼠鱗癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：鱗癌；SD大鼠
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Rca-B Cell:大鼠鱗癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非常考究你的功夫的！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
SKMES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
細胞生長特性：貼壁
Rca-B Cell:大鼠鱗癌細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
COLO 741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
Rca-B Cell:大鼠鱗癌細胞系
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
FD-LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
KU19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞
HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
NCI-H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
WM239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
SK-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
HEK293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
T98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
hTERT-RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞
Rca-B Cell:大鼠鱗癌細胞系
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
C41細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
NCI H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細胞、PGBE1細胞、S3 HeLa細胞
"