"DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:胰腺癌;雄性;Lewis KMH2細胞系相關產品:SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞 CEM/0細胞系相關產品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞 KTCTL140細胞系相關產品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞 PL45細胞系相關產品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細胞系 細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結:懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 GH 3細胞系相關產品:HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞 RPMI-8226S細胞系相關產品:RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞 CCD 841 CoN細胞系相關產品:SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞 LAD-2細胞系相關產品:293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞 NCI-H810細胞系相關產品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞 細胞生長特性:貼壁 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細胞系 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 ME-180細胞系相關產品:B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞 H157細胞系相關產品:CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞 CAL 12細胞系相關產品:PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞 Line 697細胞系相關產品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞 OCI-Ly 7細胞系相關產品:H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞 PZ-HPV-7細胞系相關產品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞 KBM5細胞系相關產品:KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細胞系 NCI-H2170細胞系相關產品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞 EFM-192C細胞系相關產品:C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞 MDCK-II細胞系相關產品:C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞 RPTEC/TERT 1細胞系相關產品:RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞 DanG細胞系相關產品:207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞 Nb2a細胞系相關產品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞 Panc-10.05細胞系相關產品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞 Hs68細胞系相關產品:DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞 Panc-3_27細胞系相關產品:WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞 Panc-3_27細胞系相關產品:WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞 GM02132C細胞系相關產品:HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞 HOS/MNNG細胞系相關產品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞 A3細胞系相關產品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞 MTC-TT細胞系相關產品:UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞 KMS26細胞系相關產品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 GTL 16細胞系相關產品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞 Epstein-Barr-2細胞系相關產品:HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞 Onda 11細胞系相關產品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞 KP 4細胞系相關產品:Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞 HEK293-FT細胞系相關產品:SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞 WILL-2細胞系相關產品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞 JROECL 19細胞系相關產品:BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞 H-1573細胞系相關產品:HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞 NOZAWA細胞系相關產品:ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞 NCIH889細胞系相關產品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞 Jurkat細胞系相關產品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞 Panc-03.27細胞系相關產品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞 MDAMB415細胞系相關產品:293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞 EB2細胞系相關產品:CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞 SNU423細胞系相關產品:OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞 Sol8細胞系相關產品:RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞 4-1st細胞系相關產品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞 NR-8383細胞系相關產品:SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞 SRA01/04 (HLE)細胞系相關產品:AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞 SUD6細胞系相關產品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞 CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞 Be Wo細胞系相關產品:MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞 OEC19細胞系相關產品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞 HFE-145細胞系相關產品:VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞 COLO.205細胞系相關產品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞 ECC 12細胞系相關產品:GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞 EL-4細胞系相關產品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞 NCI-H441細胞系相關產品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細胞系 SKNEP-1細胞系相關產品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞 mREC細胞系相關產品:SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞 MDA-MB-175細胞系相關產品:293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞 CEMC7細胞系相關產品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞 Caco-2/BBe 1細胞系相關產品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞 RMS13細胞系相關產品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞 P-3J細胞系相關產品:TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞 HEK293S細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞 RC13細胞系相關產品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞 AZ521細胞系相關產品:3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞 Be-Wo細胞系相關產品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞 8226細胞系相關產品:HCT-15細胞、SKMES1細胞、NRK clone 49F細胞 "
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